为自定义数据导入版面
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在这一节中,我们将:
1. | 导入一个版面,该版面含有进行HLA交叉配血实验中所需的所有绘图。 |
首先,让我们来导入一个两页的包含HLA交叉配血的版面。这个版面包括四组绘图,分别对应于两个阴性对照、一个阳性对照以及一个接受捐赠候选人的血清。
2. | 请选择Application Button(应用程序按钮)→Open Layout(打开版面)。 |
3. | 请打开FCS Express Sample Data(FCS Express样本数据)文件夹里的HLA Custom Data.fey版面。 |
这时会出现两个紧挨着的页面,如图T15.1所示。
图T15.1 HLA Custom Data.fey (HLA Custom Data.fey版面)
让我们先来看一下第1页顶部的四个绘图,它们都标有"PBS NEGATIVE CONTROL",如图T15.2所示。左上角的绘图显示了捐赠人的细胞;图中已有一个画在淋巴细胞群上的门,标注为"Lymphs"。右上角的密度图仅仅显示了淋巴细胞门中的细胞群,右下象限(蓝色)为CD3阳性T-细胞,左上象限(红色)是CD13阳性B-细胞。这两个针对T-细胞和B-细胞的象限已经被转化成了门,并且是Lymphs门的子门,如图中的门视图窗口所示。底部的两个柱状图(从左到右)分别应用了B-细胞群门(红色)和T-细胞群门(蓝色)。柱状图里的数字是T-细胞和B-细胞对应的IgG FITC参数的MESF中间数。
版面上的其它绘图是这四个绘图的副本,用来显示其它三个数据文件中的数据。
图T15.2 Layout of PBS NEGATVE CONTROL Plots and Gate View (PBS阴性对照绘图和门视图)
该版面并非使用任意的通道值,而是使用FITC MESF微珠校正过的通道值。这就是说IgG FITC柱状图使用的是校正过的FITC MESF坐标系。要更多地了解使用微珠的信息,请参考教程使用微珠校正荧光信号。如图T15.2所示,PBS NEG CONTROL B-细胞柱状图的中间值是2619.03。这就是说,结合到捐献者B-细胞上的可溶性IgG对应的IgG FITC信号强度大约是2,619倍的MESF。
接下来,我们将插入一个数据网格。