在这一章节,我们将:

1.导入一个版面,该版面含有进行HLA交叉配血实验中所需的所有绘图。

首先,让我们来导入一个两页的包含HLA交叉配血数据的版面。这个版面包括的数据绘图,分别对应于两个阴性对照、一个阳性对照以及一个接受候选捐赠人的血清。

2.请选择File(文件)标签→Open(打开)
3.请打开FCS Express Sample Data(FCS Express样本数据)文件夹中的HLA Custom Data.fey版面。

此时,版面的两个页面看上去将如图T15.1所示,这两个页面是相邻的。

 

Figure T15.1  HLA Custom Data.fey

Figure T15.1  HLA Custom Data.fey

 

让我们先来看一下第1页顶部的四个绘图,它们都标有"PBS NEGATIVE CONTROL",如图T15.2所示。左上角的绘图显示了捐赠人的细胞;图中已有一个圈中淋巴细胞的门,标注为"Lymphs"。右上角的密度图仅仅显示了淋巴细胞门中的细胞群,右下象限(蓝色)为CD3阳性T-细胞,左上象限(红色)是CD19阳性B-细胞。这两个针对T-细胞和B-细胞的象限已经被转化成了门,并且是Lymphs门的子门,如图中的门视图窗口所示。底部的两个柱状图(从左到右)分别应用了B-细胞群门(红色)和T-细胞群门(蓝色)。柱状图里的数字是T-细胞和B-细胞对应的IgG FITC参数的MESF中间数。

版面上的其它绘图是这四个绘图的副本,用来显示其它三个数据文件中的数据。

 

Figure T15.2  Layout of PBS NEGATVE CONTROL Plots and Gate View 

Figure T15.2  Layout of PBS NEGATVE CONTROL Plots and Gate View 

 

该版面并非使用任意的通道值,而是使用FITC MESF微珠校正过的通道值。这就是说IgG FITC柱状图使用的是校正过的FITC MESF坐标系。要了解使用微珠的更多信息,请参考“使用微珠校正荧光信号”章节。如图T15.2所示,PBS NEG CONTROL B-细胞柱状图的中间值是2619.03。这就是说,结合到捐献者B-细胞上的可溶性IgG对应的IgG FITC信号强度大约是2,619 MESF(可溶的荧光染料对等分子数)。

 

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