在本例中,我们会:
• | 学习如何使用有层次的门操作来在微球上应用门。 |
要详细了解如何插入绘图,请参见教程中的相关章节。
1. | 请打开一个新的空白版面。 |
2. | 请插入一个FSC-H vs SSC-H的点状图,数据文件来自FCS Express Sample Data(FCS Express样本数据)文件夹中的Monocytes.002文件。 |
3. | 请在单核细胞周围创建一个多边形门,并把它命名为Monocytes(单核细胞)(图T22.1)。 |
4. | 请在微球周围创建一个矩形门,将其命名为Beads1(微球1)(图T22.1)。 |
这些门看起来应该如图T22.1中左边的绘图所示。要想更多地了解如何创建门,请参考“门操作”教程。
5. | 请再创建一个点状图,来显示FL1-H vs SSC-H的绘图(图T22.1)。 |
6. | 将创建Beads1(微球1)门应用到新绘图上。要想更多地了解如何应用门,请参考“门操作”教程。 |
7. | 请在微球周围画一个新的矩形门,将其命名为Beads2(微球2),如图T22.1中右边的绘图所示。 |
Figure T22.1 Gates for Monocytes and Beads
此Beads2(微球2)门进一步将细胞与微球区分开来。根据样本中细胞与微球的分离程度,用户可以只使用一个门,但是使用两个门往往可以更干净地把微球事件分开。
在下一节中,我们会使用浓度计算器工具。