要为浓度计算器设置恰当的参数，选择Tools(工具)标签→Calculate(计算)→(浓度计算器)中设置命令来查看FCS的文本头信息。

 

要计算单一浓度：

 

•从Concentration Calculator(浓度计算器)对话框(浓度计算器)中设置对话框(图121).

 

 

Figure 12.1  Concentration Calculator - Individual Tab

Figure 12.1  Concentration Calculator - Individual Tab

 

•使用File to analyze(要分析的文件)下拉列表来选择要进行浓度计算的FCS文件。可以通过选择Gate to analyze(要分析的门)Median(中间值)。

 

•选择计算体积的方法Reference beads(参考微球)或者acquisition Time(采集时间)(见下方)。

 

•点击Calculate(计算)来计算实际浓度。样本的体积将展示于Volume Analyzed(分析过的体积)域，浓度会显示在Sample Concentration(样品浓度)域。

 

 

•Calculating Volume from Reference Beads(从参考微球计算浓度)

 

一个常用的计算试样体积的方法，就是在试样中添加一已知浓度的微球。通过计算在样品测试期间采集了多少已知浓度微球，就可计算出样品的体积。

 

o在打开(浓度计算器)中设置对话框前，在二维绘图上微球区域画一个门。
o选择Reference Beads(参考微球)单选按钮。
o在Bead Gate(微球门)域。
o在Bead Concentration(微球浓度)域。微球的浓度单位必须是beads/ml(微球/毫升)。您可输入以科学计数法表示的浓度(比如，5 x 106/ml可输入为5e6).

 

•Calculating Volume by Time(根据时间计算体积)

 

有些设备鞘液流速固定。如果知道鞘液流速和数据采集时间就可以计算体积。

 

o在Flow Rate(流速)域键入流速，单位是ml/min。
o此Start Time(开始时间)和End Time(终止时间)域从FCS文件头部分的数据自动获取。如果这些时间不对，可以直接输入开始和结束时间。此Total Time(总时间)按开始时间和结束时间的差别决定。也可以直接输入总时间。

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