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创建新的通道校正

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要创建新的通道校正:

 

请将微珠数据用柱状图显示,然后创建一个标识来界定所有微珠,如图15.1所示。

 

 

图 15.1  Setting Up Markers for Channel Calibration (为通道校正设立标识)

图 15.1  Setting Up Markers for Channel Calibration (为通道校正设立标识)

 

 

选择View(查看)Tools(工具)Channel Calibration(通道校正)命令。会出现通道校正窗口(图15.2)。

 

 

图15.2  Channel Calibration Window (通道校正窗口)

图15.2  Channel Calibration Window (通道校正窗口)

 

 

 

点击Add(添加)按钮来创建新的校正。New Calibration(新校正)对话框会跳出(图15.3)。

 

 

图15.3  New Calibration Dialog (新校正对话框)

图15.3  New Calibration Dialog (新校正对话框)

 

 

Create calibration for(为...创建校正)下拉列表中选择想要校正的参数。

 

Calculate regression from(从...计算拟合)下拉列表中选择要使用的柱状图。

 

Overlay(叠加图层)下拉菜单中选择柱状图上正确的叠加图层。当选中柱状图时,标识盒会自动在柱状图上为每个标识创建一项。可改变Number of peaks to use for regression(拟合时要用的峰值数)字段中的数值来选择更少的标识。必须用至少三个标识来计算拟合。

 

为每个峰值输入每个微珠上的分子数目。该数目由微珠的制造商提供。

 

点击Calculate(计算)按钮来进行新通道校正。新校正的公式(Slope(斜率)、Y Intercept(Y轴截距)Correlation coefficient(相关系数))会出现在Results(结果)框中。

 

Dye molecules:Antibodies(染料分子:抗体比率)(也称为F:P)一般是1:1,但也可改成其它值。F:P比由实验中使用的抗体生产公司提供。

 

点击OK,接受这个新校正。