创建新的通道校正
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要创建新的通道校正:
• | 请将微珠数据用柱状图显示,然后创建一个标识来界定所有微珠,如图15.1所示。 |
图 15.1 Setting Up Markers for Channel Calibration (为通道校正设立标识)
• | 选择View(查看)→Tools(工具)→Channel Calibration(通道校正)命令。会出现通道校正窗口(图15.2)。 |
图15.2 Channel Calibration Window (通道校正窗口)
点击Add(添加)按钮来创建新的校正。New Calibration(新校正)对话框会跳出(图15.3)。
图15.3 New Calibration Dialog (新校正对话框)
• | 从Create calibration for(为...创建校正)下拉列表中选择想要校正的参数。 |
• | 从Calculate regression from(从...计算拟合)下拉列表中选择要使用的柱状图。 |
• | 从Overlay(叠加图层)下拉菜单中选择柱状图上正确的叠加图层。当选中柱状图时,标识盒会自动在柱状图上为每个标识创建一项。可改变Number of peaks to use for regression(拟合时要用的峰值数)字段中的数值来选择更少的标识。必须用至少三个标识来计算拟合。 |
• | 为每个峰值输入每个微珠上的分子数目。该数目由微珠的制造商提供。 |
• | 点击Calculate(计算)按钮来进行新通道校正。新校正的公式(Slope(斜率)、Y Intercept(Y轴截距)、Correlation coefficient(相关系数))会出现在Results(结果)框中。 |
• | Dye molecules:Antibodies(染料分子:抗体比率)(也称为F:P)一般是1:1,但也可改成其它值。F:P比由实验中使用的抗体生产公司提供。 |
• | 点击OK,接受这个新校正。 |