在本节中,你将会学到:
• | 如何把数据导入到FCS Express第5版中,以便查看二维绘图和一维绘图。 |
这一部分适用于单个图片数据组,这组图片不是从96孔细胞盘上采集的,而是从例如一个玻片上拍下来的。
在CellProfiler中调整了导出设置并运行了管道后,你便可以来分析图片及把数据导入到FCS Express第5版中。
1. | 导入Section4pipelineCOMPLETED.cp管道文件到CellProfiler中。 |
2. | 请在CellProfiler中选择默认的输入和输出文件夹。 |
3. | 在CellProfiler中分析图片。 |
把单个图片实验导入到FCS Express中
在开始以下步骤之前,我们先对FCS Express Preferences(FCS Express设置)做一点解释:
File selection(文件选择)对话框必须激活:
A. | 通过选择File(文件)→Options(选项)来打开FCS Express User Options(FCS Express用户选项)。 |
B. | 在Files/Directories(文件/路径)项目类别 下,选中"When creating a new plot, always display the selection dialog(当创建一绘图,总是显示选择对话框)”复选框。 |
(启用这个功能不是使用FCS Express的必需条件, 在本教程中选择这个功能只是为了方便)
4. | 打开FCS Express第五版。 |
5. | 通过选择File(文件)→Options(选项)来打开FCS Express User Options(FCS Express用户选项)。 |
6. | 从Data Loading(数据导入)项目中选择Cell Profiler Options(Cell Profiler选项)(图T24.35)。 |
7. | 从delimiter(分隔符)下拉列表中选择csv(逗号分隔符)。 |
8. | 取消对Load path names from Cell Profiler table of contents file(从内容文件的Cell Profiler表格中,导入路径名)复选框的选择。 |
9. | 点击OK,来关闭FCS Express User Options(FCS Express用户选项)对话框。 |
注意:本例中没有和数据相关的图片,所以Load Images(导入图片)复选框必需处于非选中状态。
这些都做完后,对话框看起来应该如图T24.35所示。
Figure T24.35 Data Loading Options for Data Only Importing
9. | 请选择Insert(插入)→2D Plots(二维绘图)→Dot(点状图)命令(图T24.36)。 |
Figure T24.36 Inserting a Dot Plot
10. | 请在版面上任意位置点击,Select a Data File(选择一数据文件)对话框将出现。 |
11. | 请来到你保存CellProfiler中输出数据的Default Output Folder(默认输出文件夹)。 |
12. | 在Files of type(文件类型)下拉列表中,更改文件类型为CellProfiler (*.cpout)。在本例中,它们的名称分别为cells_05.cpout和nuclei_05.cpout(图T24.37)。 |
Figure T24.37 Select a Data File Dialog
13. | 选中cells_05.cpout。 |
14. | 点击Open(打开)。 |
注意:在本例中, 我们将使用cells_05.cpout文件, 该文件将显示在CellProfiler中,被IdentifySecondaryObjects(确认次要对象)模块归为5分钟时间点对象的数据, 这一模块对应于整个细胞区域。文件nuclei_05.cpout将显示CellProfiler中,被IdentifyPrimaryObjects(确定主要对象)模块归为5分钟时间点对象的数据,这个模块对应于细胞的细胞核区域。
15. | 从X-Axis parameter(X-轴参数)栏选择AreaShape_Area(面积形状_面积)(图T24.38)。 |
16. | 请从Y-Axis parameter(Y-轴参数)Y-栏选择Intensity_MeanIntensity_Cytoplasm(强度_平均强度_细胞质)(图T24.38)。 |
17. | 点击OK。 |
Figure T24.38 Open 2D Plots Dialog
此时,一点状图会出现在版面上,表明数据被成功导入 (图T24.39)。
注意:通过选择Format(格式)栏中的Plot Options(绘图选项)→Overlay(数据层),您可以轻松的更改点状图大小。
Figure T24.39 Dot Plot Created for cells_05.cpout
下一个练习中,我们将为cellProlifer选择特定参数。