在本例中,我们会:

把标记链接到门。
移动一个有门链接的标记,然后观察门的自动更新。

通过选择Gating(门操作)→Create Gates(创建门)→Create Marker(创建标记)命令,可以把标记直接创建到二维绘图上。要想更多地了解如何在二维绘图上创建一维门,请参考教程中关于使用门的相关章节

1.请选择File(文件)标签→Open Layout(打开版面)
2.请打开Tutorial Sample Data archive(教程样本数据库)中的Marker2RegionLink.fey版面

该版面包括GFPSample.002文件对应的一个二维绘图和两个柱状图(图T7.7)。左上角的FSC-SSC绘图上有个门Whole Cells(所有细胞)。上方的FL1柱状图显示的是Whole Cells(所有细胞)门,并带有一个标记M1。下方的柱状图也是一个FL1的柱状图,只是它没有标记。

 

Figure T7.7  Marker2RegionLink.fey Layout

Figure T7.7  Marker2RegionLink.fey Layout

 

3.请右键点击右上方的、有标记M1的FL1柱状图。

这将调出相关的弹出菜单。

4.请从弹出菜单中选择Convert Marker to Gate(把标记转化为门)→Marker #1 (M1)(第1个标记(M1))→Convert and Link(转化和链接)(图T7.8)。

 

Figure T7.8  Converting the Marker M1 to a Gate

Figure T7.8  Converting the Marker M1 to a Gate

 

此时,Create New Gate(创建新门)对话框将出现,如图T7.3所示。我们将在这里为链接到标记的新门命名。

5.输入“GFP(+)”到Create a new gate named(创建一个新门名称)字段处。
6.点击OK(图T7.3)。
7.请在没有标记的右下方柱状图FL1内单击。绘图边框会变为绿色(图T7.9)。
8.请选择Gating(门操作)标签,如前图T7.4所示
或者,选择Home(主页)标签(图T7.9)。
9.Current Gate(当前门)下拉列表中选择“GFP(+)”(图T7.9)。

 

Figure T7.9  Applying the GFP(+) Gate to the Lower Right Histogram

Figure T7.9  Applying the GFP(+) Gate to the Lower Right Histogram

 

右下方的柱状图现在只显示标记M1里有的事件(图T7.10)。

 

Figure T7.10  Lower Right Histogram Gated on GFP(+)

Figure T7.10  Lower Right Histogram Gated on GFP(+)

 

因为标记M1链接到了门,更改标记的位置也会相应地改变GFP(+)

10.请点击版面右上方的、带有标记M1的柱状图FL1。边框又一次地变成绿色。
11.请在标记M1上单击,将其选中。当选中标记进行编辑时,标记将带有三个调整大小的矩形(图T7.11)。

 

Figure T7.11  Active Marker M1 with Resizing Rectangles

Figure T7.11  Active Marker M1 with Resizing Rectangles

 

12.请把鼠标移动到中间的调整大小矩形上。光标移动到正确位置上时,它会变成一个四向的箭头。

现在我们把整个M1标记移动到柱状图上一个新的位置。或者,我们可以通过选中标记一端将其移动来改变标记大小。

13.按下鼠标左键不放。
14.请把鼠标向右移(图T7.12)。

这时会出现指向下方的箭头,指明标记在x-轴上的对应的位置。标记上方是通道编号,指明标记的两个边界(图T7.12)。

 

Figure T7.12  Moving Marker M1

Figure T7.12  Moving Marker M1

 

15.标记移动到想要的位置时,请松开鼠标(图T7.12)。

右下方的柱状图FL1会跟着更新,来反映对M1做的更改(图T7.13)。

 

Figure T7.13  Histogram Gated on GFP(+) Updated to Reflect Changes made to Marker M1 Position

Figure T7.13  Histogram Gated on GFP(+) Updated to Reflect Changes made to Marker M1 Position