在本例中,我们会:
• | 使用微珠(或时间)以及流速来设置浓度计算器,以在版面中显示结果。 |
• | 把计算好的浓度作为统计数据显示在统计窗口中。 |
我们已经学会了怎样对一个样本中的细胞浓度进行一次性地计算。我们现在要学习如何使用statistics window(统计窗口)来把这些数据显示在版面中。
1. | 请右键点击包含Beads1(微球1)和Monocytes(单核细胞)门的前向vs.侧向的绘图,来调出弹出菜单。 |
2. | 请从弹出菜单选择Statistics(统计)→Gate Statistics(门统计)选项。 |
此时,Gate Statistics window(门统计窗口)将出现(图T22.5)。请把统计窗口移到版面上一个方便操作的位置。
Figure T22.5 Statistics Window
3. | 单击statistics window(统计窗口),将其选中,它周围将出现一绿色的边框(图T22.5)。 |
4. | 请选择Format(格式)→Statistics Options(统计选项)→Statistics(统计)命令(图T22.6)。 |
Figure T22.6 Selecting Format Statistics Command
此时,Formatting Statistics(格式化统计)对话框(图T22.7)。我们现在要来选择在版面中的statistics window(统计窗口)中显示哪些统计数据。
5. | 请在Formatting Statistics(格式化统计)对话框中仅选择以下选项(图T22.7): |
• | Gate(门)![]() |
• | Number of Events(事件数)![]() |
• | % of Gated Cells(门中细胞百分比)![]() |
• | % of All Cells(占总细胞百分比)![]() |
• | Concentration(浓度)![]() |
6. | 点击OK,来关闭Formatting Statistics(格式化统计)对话框。 |
Figure T22.7 Formatting Statistics Dialog
此时,statistics window(统计窗口)将出现(图T22.8),展示了刚才在Formatting Statistics(格式化统计)对话框中选中的项目。
Figure T22.8 Statistics Window after Formatting
我们有其它两种方法来对statistics window(统计窗口)进行格式化,以便仅仅显示我们想要的统计:
• | 请使用statistics window(统计窗口)弹出菜单来选择要显示的统计: |
A. | 右键点击statistics window(统计窗口),来调出相关的弹出菜单(图T22.8)。 |
B. | 请左键点击想要显示的统计选项。 |
C. | 请左键点击那些你不想要的选项(图T22.9)。 |
Figure T22.9 Statistics Window Pop-up Menu
• | 请使用statistics window Format(统计窗口格式)对话框来选择要显示的统计: |
A. | 右键点击statistics window(统计窗口)来调出相关的弹出菜单(图T22.9)。 |
B. | 请从弹出菜单选择Format(格式)选项。 |
C. | 请从Format(格式)对话框左边的面板中选择Stats(统计)(图T22.10)。 |
D. | 请设置你想要显示的统计,然后点击OK(图T22.10)。 |
Figure T22.10 Stats Category of the Statistics Window Format Dialog
正如你在图T22.8中所看到的一样,statistics window(统计窗口)中有一Concentration(浓度)列,但它还未进行定义,所以只显示n/a。现在,我们就对FCS Express进行设置,来计算这些浓度。
7. | 请选择View(查看)→Tools(工具)→Concentration Calculator(浓度计数器)命令(图T22.2)。 |
此时,Concentration Calculator(浓度计算器)对话框将出现,如前图T22.4所示。
8. | 请点击名为Stats Window Setup(统计窗口设置)的第二个标签卡(图T22.11)。 |
和前面一样,有两种计算浓度的方法: a) 指明一个微珠门并给出样本中微珠的浓度,或者b) 使用数据采集中获得的time(时间)和样本flow rate(流速)。我们将在这里设置参考微珠,如图T22.11所示。
9. | 请选择Reference beads(参考微球)单选按钮。 |
10. | 请选择Bead Gate(微球门)下拉列表中的Beads2(微球2)。 |
11. | 输入100000到Bead Concentration(微球浓度)域中。 |
12. | 点击OK(图T22.11)。 |
Figure T22.11 Concentration Calculator Dialog -- Stats Window Setup
现在,statistics window(统计窗口)中的Concentration(浓度)列,会显示根据我们前面定义的参数计算出的绘图中的所有门的浓度(图T22.12)。这个设置会应用于整个版面,并被用来计算版面中所有绘图的浓度统计。
Figure T22.12 Statistics Window with Concentration Results by Gate
现在,我们将把浓度作为标记来显示。