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通道校正演示

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通道校正演示

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在本例中,我们会:

演示通道校正在数据显示上的影响。

 

我们现在要来打开一个新的柱状图,演示通道校正如何影响数据的显示。

1.请使用教程样本数据库中的Monocytes.002文件来插入一个新的柱状图。
2.请设置新的柱状图,让它来显示通道FL3-H。
3.请确保柱状图上未应用门。

这时的柱状图应该看起来如图T23.9所示。注意到x-轴从低于102延伸到高于105。数轴显示为已经经过校正,代表可溶性PE-Cy5分子的平均等值数。这是因为默认的设置是在所有绘图上使用校正过的数轴。

 

图T23.9  Histogram with Calibrated Axis (带有校正过的数轴的柱状图)

图T23.9  Histogram with Calibrated Axis (带有校正过的数轴的柱状图)

 

4.请右键点击柱状图,调出相关弹出菜单。
5.请从弹出菜单上选中Statistics(统计)

这时会出现和柱状图相关的Statistics window(统计窗口)

6.请把Statistics window(统计窗口)移到柱状图的下方。
7.请在Statistics window(统计窗口)内部点击,将其选中;这时它周围应该有一个绿色边框。
8.请选中Format(格式)→Statistics Options(统计选项)→Statistics(统计)命令(图T23.10)。

 

图T23.10  Selecting the Format Statistics Command (选择格式化统计命令)

图T23.10  Selecting the Format Statistics Command (选择格式化统计命令)

 

这时会出现Formatting Statistics(格式化统计)对话框。

9. 请选中Formatting Statistics(格式化统计)对话框中的以下项目: Median(中间数)Geometric Mean(几何平均数)Arithmetic Mean(算术平均数)CV(变差系数)Peak Value(峰值)以及Peak Channel(峰值通道)
10. 请取消对Formatting Statistics(格式化统计)对话框中其它项目的选择。
11. 请点击OK

这时的统计窗口应该看起来如图T23.11所示。

 

图T23.11  Statistics Window for Histogram with Calibrated Axis (经过数轴矫正的柱状图所对应的统计窗口)

图T23.11  Statistics Window for Histogram with Calibrated Axis (经过数轴矫正的柱状图所对应的统计窗口)

 

12. 请右键点击柱状图,调出相关弹出菜单。
13. 请从弹出菜单上选中Format(格式化)

这时会出现Formatting(格式化)对话框。

14. 请移动一下Formatting(格式化)对话框,使得柱状图以及统计窗口都可见。
15. 请在Formatting(格式化)对话框左边的类别选项中选择Histogram(柱状图)→Histogram Specific Options(柱状图特定选项),如前面的图T23.4所示。

注意到Use channel calibration on axis(在数轴上使用通道校正)处于选中状态。

16. 请取消对Use channel calibration on axis(在数轴上使用通道校正)选项的勾选(图T23.4)。
17. 请点击Preview(预览)键。

注意到柱状图曲线自身并未改变,但数轴却回到了未经校对的100到104范围。注意到当数轴从校正改为非校正后,统计窗口的数值也随着改变。当校正有效时,统计数据的单位代表PE-Cy5的MESF值。不使用校正时,统计数据的单位代表FCS文件中从原始数据中获得的没有特定意义的值。

18. 请点击Cancel(取消),关闭Formatting(格式化)对话框。

 

在下一节中,我们将学习保存以及导入通道校正