现在我们将用滴定比值的自定义标记来创建一个针对CD64浓度(体积)与单核细胞/淋巴细胞的CD64染色比值的自定义数据表格。一个自定义数据表格类似于一个电子表格,在这个表格中用户可以创建和编辑单元格。任何时间,如果您想要跳到Insert a Scatter with Regression Plot(插入带回归的散点图)章节,已完成教程中的步骤将出现在一个新的版面中,用以进行下一章节的学习。
我们首先要在版面中插入一个新的空白页,这在之前的章节中,您已经操作过。您也可以打开Define Custom Tokens(定义自定义标记)教程中已完成的、FCS Express Sample Data(FCS Express样本数据)文件夹中的Titration_Custom_Tokens_Complete.fey版面,来开始这一章节的学习。
1. | 请选择Insert(插入)→General(常规)→New Page(新建页)命令(图T17.20)。 |
Figure T17.20 Insert New Page
这时会出现一个新页面。现在我们要修改视图以便在屏幕上同时可以看到两个页面。
2. | 选择View(视图)→Multiple Pages(多重页面)→Two Pages (Vertical)(纵向双页)命令(图T17.21)。 |
Figure T17.21 View Two Pages
这时两个版面页如图T17.22所示,第2页在第1页的左侧。
Figure T17.22 Both Layout Pages
我们现在要在第2页上插入一个自定义数据表格。
3. | 选择Data(数据)标签→Save/Load(保存/导入)→Custom Data(自定义数据)→New Custom Data(新建自定义数据)命令(图T17.23)。 |
Figure T17.23 Selecting the New Custom Data Command
一个Create new custom data(创建新自定义数据)对话框将出现,如图T17.24所示。
4. | 请在名称一栏输入"Titration CD64(滴定CD64)"。 |
5. | 更改Columns(列)值为"2"。 |
6. | 更改Rows(行)值为"7"。 |
7. | 点击OK。 |
Figure T17.24 Create New Custom Data Dialog
这时在版面的第2页上会出现一个自定义数据表格。我们现在要对表格进行格式化,来输入相应的列名称。
8. | 请点击列表头"A",如图T17.25中的蓝色高亮所示。 |
9. | 请右键点击,调出弹出菜单。 |
10. | 从弹出菜单中选择Rename Selected Column(为所选列重命名)。 |
Figure T17.25 Rename Selected Column Menu Item
此时,New Column Name(新列名)对话框将出现,如图T17.26所示。
11. | 请在Enter the new name for column A(为A列输入新名称)窗口输入“volume [ul]”。 |
12. | 点击OK。 |
Figure T17.26 New Column Name Dialog
这时自定义数据表格会显示新的列名称。我们现在要为B列重复第9到第11步。
13. | 请点击列表头为"B"的列。 |
14. | 请右键点击,调出弹出菜单。 |
15. | 选择Rename Selected Column(为所选列重命名)。 |
16. | 请在New Column Name(新的列名称)对话框中的Enter the new name for column B(为B列输入新名称)窗口中输入"M/L ratio"。这是我们在自定义标记中定义的单核细胞与淋巴细胞的比值。 |
17. | 点击OK。 |
这时,自定义数据表格中的各列就被命名好了,如图T17.27所示。
Figure T17.27 Custom Data Table with Column Names
我们现在要通过把相应绘图拖放到自定义表格中,来填写自定义数据表格中的各个单元格。自定义数据表格的volume(体积)一列可以用数据文件中的关键字conc(浓度)来填充, 这些浓度值反映了实验中使用的CD64的体积。我们也可以在自定义数据表格中直接输入体积值。但是,使用关键字标记conc(浓度)会让数据分析更灵活,也会为将来的滴定实验创建一个通用的模板。如果用户的另外一个滴定实验有七个浓度,并且也使用单核细胞与淋巴细胞比率以及conc(浓度)关键字,用户可以把数据文件导入这个版面中,直接使用自定义标记和自定义表格中的设定。
18. | 将光标放在0.156 ul CD64绘图上,如图T17.28中的红色边框所示。 |
19. | 请按下鼠标左键不放,把绘图拖到自定义数据表格中。 |
20. | 当光标在volume [ul]列里的第一个单元格上时(如图T17.28所示),请松开鼠标。 |
Figure T17.28 Dragging and Dropping the 0.156 ul CD64 Plot onto the Custom Data Table
此时,Paste Special(选择性粘贴)对话框将出现,如图T17.29所示。所有的数据文件都有一个关键字"conc",指明用来染色的CD64的体积。
21. | 选择keyword token(关键字标记),如图T17.29所示。 |
Figure T17.29 Keyword Token in the Paste Special Dialog
此时,Edit Keyword(编辑关键字)对话框将出现,如图T17.30所示。
22. | 请在Select a keyword:(选择关键字)字段处输入"conc",如图T17.30中的光标所示。 |
23. | 点击OK。 |
Figure T17.30 Edit Keyword Dialog
在自定义数据表格volume(体积)列中的第一个单元格,这时会做相应的更新,显示插入关键字conc(浓度)后的结果0.156。我们现在要把这个关键字标记复制和粘贴到volume(体积)列中的下一个单元格中。
24. | 点击0.156,如图T17.31中的蓝色高亮所示。 |
25. | 请选择单元格编辑器里的灰色高亮文本"Keyword: conc for Plot #3, overlay #1"(图T17.31)。注意:每次点击一个单元格,在它对应的编辑器中用户可以修改当前单元格中的内容。 |
26. | 使用键盘上的CTRL+C键复制文本。 |
27. | 请点击列中的下一个单元格,如图T17.31中的光标所示。 |
28. | 请把光标放在编辑器窗口里(这时应该是空白的)。 |
29. | 使用键盘上的CTRL+V键来粘贴文本。 |
Figure T17.31 Copying and Pasting the Conc Keyword
我们现在来编辑关键字标记,选用0.313 μl CD64绘图。
30. | 请双击文本"Keyword: conc for Plot #3, overlay #1"。 |
此时,Edit Statistic(编辑统计)页面Data Source(数据源)项目类别将出现,类似于前面的Create Statistic(创建统计)对话框,展示于图T17.9。
31. | 选择Color Dot - 0.313 ul CD64.fcs.DNS (SS Lin vs.FL 8 Log)。 |
32. | 选择OK。 |
请为"volume(体积)"这列中的其它单元格重复第27到第32 ,并分别选择剩下的五个绘图(从0.625 μlCD64到10 μlCD64)作为数据源。这时的自定义数据表格看起来应该如图T17.32所示。
Figure T17.32 Custom Data Table with Volumn Values
我们将为the M/L ratio(单核细胞/淋巴细胞比值)列输入数据,方法是把我们以前定义好的自定义比值标记拖到自定义数据表格中的M/L ratio列里来。
33. | 请把光标放在自定义标记窗口中的“0.156 ratio”上,如图T17.33中的蓝色标记所示。 |
34. | 按下鼠标左键不放,直到把“0.156 ratio”拖到自定义数据表格中。 |
35. | 当光标在M/L ratio列里的第一个单元格上时(如图T17.33所示),请松开鼠标。 |
Figure T17.33 Dragging and Dropping the Custom Token onto the Custom Data Table
当鼠标松开时,会出现Paste Special(特殊粘贴)对话框,如图T17.34所示。
Figure T17.34 Paste Special box - Text with Tokens
这时自定义标记会显示,CD64的体积为0.156μl时对应的单核细胞与淋巴细胞的比值,如图T17.35所示。
Figure T17.35 Custom Data Table Updated with 0.156μl Data
请为所有的自定义比值标记(0.313到10)重复第33步到第35步,从而填充自定义数据表格中的M/L ratio一列。这时的自定义数据表格看起来应该如图T17.36所示。
Figure T17.36 Final Custom Data Table
观察这个自定义数据表格,会发现最大的单核细胞/淋巴细胞比值(394.73)是使用5μl的CD64时获得的。在下一节中,我们将为这些数据Insert a Scatter with Regression Plot(插入带回归分析的散点图),以便更好地显示滴定曲线。