创建新的通道校正

要创建新的通道校正:

 

将微球数据用柱状图显示,然后创建一标识来界定所以微球,如图15所示1。
Figure 15.1  Setting Up Markers for Channel Calibration

Figure 15.1  Setting Up Markers for Channel Calibration

 

请确保,用来校正的、作为原始数据源的绘图,其自身没有校正应用于其中,这可以通过通道校正教程中的第11-15步来确认

 

请选择Tools(工具)标签点击Channel Calibration(通道校正)命令(图152)。

 

Figure 15.2 - Channel Calibration Ribbon

Figure 15.2 - Channel Calibration Ribbon

 

Channel Calibration Window(通道校正窗口)将出现(图153)。

 

Figure 15.3  Channel Calibration Window

Figure 15.3  Channel Calibration Window

 

点击Add(添加)来创建一个新的通道校正。此New Calibration(新校正)对话框将出现(图154)。
Figure 15.4  New Calibration Dialog

Figure 15.4  New Calibration Dialog

 

 

请从创建校正的下拉列表中选择你希望创建的校正参数。

 

计算回归从下拉列表中选择将用作校准的数据源的直方图。

 

从数据层下拉菜单的直方图中,选择一个正确的数据层。当选中柱状图时,标识盒会自动在柱状图上为每个标识创建一项。您可以通过更改要用于回归的峰数域中的值来选择使用较少的标记。但必须用至少三个标识来计算拟合。

 

在标识下方为该峰值输入每个微球上的分子数目。该数目由微球的制造商提供。

 

点击Calculate(计算)来计算新通道校正。新校正的公式(Slope(斜率)Y intercept(Y轴截距)Correlation coefficient(相关系数))会出现在结果对话框。

 

Dye molecules:Antibodies(染料分子:抗体)(也成为F:P)比一般是1:1,但也可改成其它值。F:P比由实验中使用的抗体生产公司提供。

 

点击OK来接受新校正。

 

可用Channel Calibration dialog(通道校正对话框)来对通道校正进行保存、编辑或者重新导入